首頁抗體藥物研發(fā)服務(wù)平臺--羊駝免疫納米抗體文庫定制
一、服務(wù)簡介
納米抗體(nanobody,Nb)，即重鏈單域抗體VHH(variable domain of heavy chain of heavy
chainantibody)，該類抗體只包含一個重鏈可變區(qū)(VHH)和CH2，CH3區(qū)，相比于其他抗體，輕鏈天然缺失。納米抗體晶體直徑2.5nm，長4m，是自然存在的可以和抗原結(jié)合的最小片段。
二、納米抗體的應(yīng)用
納米抗體能用于構(gòu)建多重不同類型的分子結(jié)構(gòu)，在醫(yī)學(xué)診斷和治療上實用性較高。例如可以構(gòu)建成雙功能抗體或雙特異性抗體進(jìn)行疾病的靶向治療。通過基因改造，納米抗體可以形成多聚體，大大提高了抗體與抗原的結(jié)合能力。通過基因工程形成納米抗體融合蛋白可以帶上酶或者毒素，融合蛋白在組織穿透，清除速度及穩(wěn)定性上比普通抗體更有優(yōu)勢，可以用于低濃度抗原的檢測。
三、科斯坦生物的優(yōu)勢
針對特定靶點的納米抗體定制服務(wù)
科斯坦可以提供針對特定靶點的特異性納米抗體定制服務(wù)，包括抗原檢測，羊駝免疫，采血，效價檢測，納米抗體噬菌體庫構(gòu)建及淘選，特異性高親和力納米抗體篩選，表達(dá)，檢測一條龍服務(wù)。親和力可以達(dá)到10-8~10-10M級別。
四、案例展示
針對靶點B的特異性納米抗體定制服務(wù):
1. 靶點B免疫羊駝，進(jìn)行四輪免疫后采血提取PBMC，經(jīng)RNA提取，反轉(zhuǎn)錄獲得cDNA后擴(kuò)增獲取VHH可變區(qū)片段
2.免疫羊駝納米抗體庫的構(gòu)建:
將獲得的VHH可變區(qū)片段連入噬菌體展示載體，電轉(zhuǎn)宿主菌，最終獲得庫容為8.76*10^9納米抗體庫，插入正確率為100%
3.免疫羊駝納米抗體庫的淘選及篩選:
利用構(gòu)建的免疫羊駝納米抗體庫，針對靶點B蛋白，完成三輪淘選，其淘選富集度如下:
篩選96個克隆，其中陽性克隆共94個，陽性率為97.9％
排除重復(fù)序列，最終獲得了7條不同的抗體序列。將這些抗體序列表達(dá)成可溶性的VHH抗體蛋白，進(jìn)行再次驗證，結(jié)果如下：
隨機(jī)挑選兩條抗體蛋白進(jìn)行親和力測定，結(jié)果如下：
R1P1-A10:KD:6.49E-09M
R1P1-H12:KD:1.52E-07M
五、咨詢與訂購
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